🔀 Flujo del proceso de análisis

Representación visual del pipeline completo: desde la toma de muestras de coral hasta el análisis de expresión diferencial. Las ramas principales corresponden a la clasificación taxonómica y al análisis de expresión.

🧭 Vista general

🧫 Muestras de coral
Leptogorgia · Eunicella
🧪 Extracción de ADN
8 muestras · ADN01–ADN08
🔬 Secuenciación
generación de lecturas
📄 FASTQ
lecturas crudas por muestra
🧹 Filtrado con bbduk
adaptadores · contaminantes · calidad
🧬 Clasificación con Kraken2
base de datos personalizada
📊 Análisis taxonómico
clusters Lepto / Eunicella · contaminantes

🔬 Pipelines de análisis (Dawei)

El análisis de las muestras de coral sigue dos pipelines complementarios: metagenómico (ADN) para caracterización taxonómica del holobionte, y metatranscriptómico (ARN) para análisis del perfil funcional. Los parámetros están optimizados para octocorales mediterráneos.

🧫 Muestras de coral
8 muestras ADN · 1 muestra ARN (TS004)
🧬 Pipeline ADN
Metagenómica
🧹 BBDuk
qtrim=20 · minlen=100 · ~94% retención
🔍 Kraken2
BD personalizada: Octocorallia + Symbiodiniaceae
📊 Clasificación taxonómica
2 clusters: Lepto ~94% / Eunicella ~85%
🧬 Pipeline ARN
Metatranscriptómica
🧹 BBDuk + SortMeRNA
filtrado adaptadores y ARNr
Pipeline A
HISAT2 → Bam → BBNorm
Pipeline B
rnaSPAdes → TransDecoder → eggNOG → Salmon
Resultado ADN

108.749 transcritos (ARN TS004)

Mapeo Salmon: 99.69% tasa de éxito. Leptogorgia dominante en cluster A, Eunicella en cluster B.

Resultado ARN

Perfil funcional

83.38% transcritos sin clasificar. Bacteria 9.39%, Homo 4.36%, Cnidaria 0.05%.

Anotación

28.203 proteínas identificadas

Genes de mayor expresión: plásmidos bacterianos (lacZ, beta-lactamase) y vertebrados (EMP2).

Nota

Sin expresión Octocorallia funcional

Los niveles superiores de expresión no muestran genes funcionales de coral o simbiontes.

💡 Indicaciones científicas clave

ADN · Metagenómica

Dos perfiles de especie dominante

ADN01, 05, 07 y 08: Leptogorgia sarmentosa (>94%). ADN02, 03, 04 y 06: Eunicella verrucosa (~60%) + Eunicella cavolini (~24%). El resto <0.2%.

ARN · Ensamblaje

108.749 transcritos · mapeo 99.69%

La muestra TS004 generó 108.749 transcritos con un mapeo Salmon del 99.69%. La mayoría se concentró en secuencias cortas (150–350 pb) sin capacidad codificante.

ARN · Taxonomía

Sin señal de coral, exceso de bacterias y humanos

83.38% no clasificados, 9.39% bacterias (Pseudomonadota), 4.36% Homo sapiens y solo 0.05% Cnidaria. Ausencia de expresión funcional de Octocorallia o Symbiodiniaceae.

ARN · Función

Genes altamente expresados de plásmidos

28.203 proteínas anotadas; los genes con mayor expresión pertenecieron a plásmidos de laboratorio (lacZ, beta-lactamase), bacterias (oprF, mucA) y vertebrados (EMP2).